کاربرد تکنیک رسانی سنجی برای ساخت الکترود آنزیمی اوره

تکنیک رسانایی سنجی یکی از روش های معمول در سنجش های آنزیمی است که اساس آن بر تشخیص یون های موجود در محلول مورد سنجش می باشد. با استفاده از این تکنیک و همچنین طراحی و ساخت الکترودهای اصلاح شده آنزیمی، می توان به غلظت سوبسترای موجود در محلول پی برد. در پژوهش حاضر سنجش و اندازه گیری محلول اوره مد نظر بوده و سعی شده است پارامترهای مختلف آن مورد بررسی قرار گیرد. در ابتدا خصوصیات و ویژگی های انواع روش های سنجش اوره مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت سپس از بین آنها، روش رسانایی سنجی به خاطر دقت و حساسیت نسبتا بالا و سادگی کار انتخاب گردید. در مرحله اول، از الکترودهای پلاتینی برهنه در حضور آنزیم برای سنجش اوره استفاده شد. سپس با الکترود پلاتینی اصلاح شده با آنزیم، سنجش اوره بررسی شد و مزایا و معایب هر دو روش مشخص گردید. در نهایت توانایی الکترود آنزیمی ساخته شده در تشخیص کمی اوره مورد بررسی قرار گرفت. روش های تثبیت آنزیم به طور کلی و روش تثبیت مستقیم آنزیم روی الکترود پلاتینی با استفاده از دو روش اکلتروپلیمریزاسیون و پیوند کوالان بررسی شد و با توجه به مزیت تثبیت با پیوند کوالان، روش اخیر برای تثبیت آنزیم اوره آز در سیستم تفاضلی استفاده شد. پس از تثبیت آنزیم پارامترهای تثبیت کنترل و بهینه گردید. در نهایت پارامترهای آنالیتیکی الکترود ساخته شده مورد مطالعه قرار گرفت. آزمایش های انجام شده نشان دادند که حد تشخیص غلظت اوره توسط الکترود آنزیمی 016/0 میلی مولار است که تا غلظت 8/5 میلی مولار پاسخ الکترود خطی است. زمان پاسخ الکترود در ناحیه خطی 30 ثانیه است. با استفاده پیاپی از الکترود در دمای 28 درجه سانتی گراد در مدت 3 هفته تغییر اندکی در پاسخ الکترود حاصل می شود.